FITC-Glucan|FITC-昆布多糖的介紹
FITC-Glucan,即熒光素異硫氰酸酯(Fluorescein Isothiocyanate,簡稱FITC)標記的葡聚糖,是一種重要的科研試劑。以下是對FITC-Glucan的詳細介紹:
一、基本性質
結構:FITC-Glucan是通過將熒光素異硫氰酸酯與葡聚糖結合而得到的化合物。
外觀:通常以黃色/橙色粉末形式供應,也可以黃色溶液形態的鹽溶液形式供應。
溶解性:可溶于水,并能在某些極性有機溶劑如DMSO、甲酰胺中溶解,但不溶于低級脂肪醇、丙酮、氯仿、二甲基甲酰胺。
熒光特性:具有強烈的綠色熒光,激發波長通常為495nm,發射波長為520nm。
二、應用
細胞和組織中的滲透性和運輸研究:
通過測量熒光,FITC-Glucan可以提供健康或患病組織的實時滲透性定量數據。
已應用于腸道組織、腦和神經系統、腫*組織、眼內以及腎組織的滲透性研究。
pH探針:
FITC-Glucan可用作細胞中的pH探針,用于監測細胞內的酸堿環境變化。
其他應用:
還可用于過濾器、凝膠等材料的滲透性研究。
在生物學研究中,可用于標記細胞結構或分析生物分子的位置和動態。
三、儲存與穩定性
儲存條件:應冷藏于-20℃的環境中,以確保其穩定性和活性。
穩定性:
FITC-Glucan在體外和體內的穩定性都非常好,只有在高pH(>9)和高溫下,熒光素標記才有發生水解的風險。
在特定的研究條件下(如兔血漿、肌勻漿、肝勻漿和尿液中),FITC-Glucan的穩定期均不短于3天。
四、制備與標記步驟
雖然具體的制備和標記步驟可能因實驗要求和樣品特性而有所不同,但通常包括以下基本步驟:
準備FITC-Glucan溶液:將FITC溶解在適當的溶劑中,然后加入葡聚糖溶液,攪拌使其充分混合。
反應:將FITC-Glucan溶液加入到待標記的樣品或生物分子中,使其與目標分子發生反應。具體的反應條件(如反應時間、溫度等)應根據實驗要求進行優化。
反應停止與洗滌:在一定的反應時間后,通過加入抑制劑或洗滌液來停止反應,并去除未反應的FITC-Glucan和雜質。
分析和觀察:使用熒光顯微鏡或其他熒光分析技術對標記后的樣品進行觀察和分析,以獲得標記的結果。
五、注意事項
安全性:僅用于科研目的,不能用于人體實驗。
操作規范:在制備和使用FITC-Glucan時,應遵守實驗室的安全操作規程,避免與皮膚、眼睛等直接接觸。
質量控制:為確保實驗結果的準確性,應對FITC-Glucan進行質量控制,包括純度、熒光強度等方面的檢測。
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