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HRP-Alkyne|辣根過氧化物酶-炔基的介紹

2025-02-24 [84]

辣根過氧化物酶-炔基(HRP-Alkyne)是一種通過將辣根過氧化物酶(HRP)與炔基化合物結合而形成的生物標記化合物,以下是其詳細介紹:

結構特點

辣根過氧化物酶是一種含四個二硫鍵的單鏈多肽,由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結合而成的糖蛋白,含18%碳水化合物。炔基通過與HRP分子中的特定基團反應而結合,形成HRP-炔基復合物。

制備方法

  • 炔基化合物的合成或采購:合成或采購所需的炔基化合物,確保其在反應中的活性。

  • HRP與炔基的偶聯:將HRP與炔基化合物進行化學反應,通常在適當的緩沖液中進行,以確保兩者的有效結合。

  • 純化和驗證:反應完成后,通過透析、凝膠過濾或高效液相色譜(HPLC)純化標記產物,以去除未反應的底物和其他雜質。使用紫外-可見光光譜和酶活性分析確認HRP的成功標記,并評估其活性。

功能特性

  • 催化活性:HRP-炔基保留了辣根過氧化物酶的催化能力,能夠催化多種底物的氧化反應,如在過氧化氫存在下,催化底物產生顏色變化或化學發光信號。

  • 反應性基團:炔基作為反應性基團,能夠與含疊氮基團的分子發生點擊化學反應,形成穩定的共價結合,可用于標記抗體、蛋白質或其他生物分子,實現信號放大和檢測。

應用領域

  • 生物成像:HRP-炔基可用于生物成像技術,通過其酶活性催化熒光底物反應,生成熒光信號以進行細胞成像。

  • 酶聯免疫吸附測定(ELISA):HRP-炔基可以用于標記抗體或抗原,增強ELISA的靈敏度和特異性。

  • 藥物傳遞和靶向治療:利用炔基的化學反應性,HRP-炔基可以與其他分子結合,用于藥物傳遞和靶向治療。

  • 構建復雜的生物分子:HRP-炔基可以與其他具有功能團的分子通過點擊化學反應結合,用于構建復雜的生物分子結構。

注意事項

  • 保存條件:HRP-炔基應在冷藏條件下(-20℃)保存,以保持其活性和穩定性。

  • 使用前處理:使用前需根據具體實驗要求進行適當的處理,如溶解、稀釋等,并注意避免反復凍融。

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